Follistatiin 344 1mg/viaal inhibeerib tugevalt müostatiini

Folliikuleid

Aktiviini-siduv valk|Lihaskasvu positiivne regulaator 1mg/viaal

Üldnimetus: folliikuleid -stimuleeriv hormoon 344

Ingliskeelne nimi: Follistatiin 344

Valgu struktuur: Rekombinantne valk, 344 aminohappest koosnev follistatiini isovorm.

Molekulmass: ligikaudu 38-42 kDa (pärast glükosüülimist)

Puhtus: suurem või võrdne 90% (SDS-PAGE/HPLC)

Sisu: 1mg/pudel

Välimus: valge või tuhm{0}}valge lüofiliseeritud pulber

Säilitamine: Külmutage temperatuuril -80 kraadi, kaitske valguse eest ja hoidke kuivas kohas.

Kasutus- ja ladustamisjuhend

Follistatiin 344:

Folliikuli -stafüliin 344 on looduslikult esinev glükoproteiin, mille põhifunktsioon on suure-afiinsusega sidumisvalguna ja kasvufaktori- superperekonna liikmete, nagu aktiviin ja müostatiin, muundamise neutraliseerija. Nende ligandidega seondudes blokeerib folliikulite{5}}stafüliin 344 tõhusalt nende interaktsiooni rakupinna retseptoritega, leevendades seeläbi lihaskasvu negatiivseid regulatiivseid signaale. Eksperimentaalsetes mudelites soodustab see inhibeeriv toime oluliselt skeletilihasrakkude proliferatsiooni ja diferentseerumist, suurendades lõpuks lihasmassi. Võrreldes kasvufaktorite otsese süstimisega avaldab folliikuli -stafüliin 344 oma mõju endogeenset signaalivõrku moduleerides, pakkudes ainulaadset tööriista lihaste hüpertroofia mehhanismide uurimiseks, lihasatroofia raviks ja metaboolse regulatsiooni uurimiseks.

Tänu oma võtmerollile lihaste kasvu reguleerivas rajas kasutatakse follistatiin 344 laialdaselt lihasbioloogias, spordimeditsiinis, neuromuskulaarsetes haigustes (nt lihasdüstroofia) ja kahheksia uuringutes. Võrreldes inhibiitoritega, mis on suunatud ühele ligandile (nagu anti-müosiini antikehad), on follistatiin 344-l laiem ligandi sidumisspekter, mistõttu on see laiahaardelisem uurimisvahend lihaste kasvu ja regeneratsiooni globaalse regulatsiooni uurimiseks, sünergistlike mõjude hindamiseks ja selle terapeutilise potentsiaali uurimiseks keerulistes patoloogilistes mudelites (nagu Duchenne'i lihaste kahhexiatrophyne'i vähk ja kachexiatrophyne'i vähk).

Folliikuleid -stimuleeriva hormooni 344 kasutamine:

Multifunktsionaalse endogeense siduva valguna kasutatakse seda in vitro ja in vivo mudelites tugevaks seondumiseks ja neutraliseerimiseks TGF{0}} ülemperekonna liganditega, nagu aktiviin ja müostatiin, uurides seeläbi selle raja blokeerimise laiaulatuslikku mõju müoblastide saatusele, skeletilihaste massile ja funktsioonidele ning süsteemsele metaboolsele homöostaasile. Seda kasutatakse peamiselt sekkumisstrateegiate uurimiseks lihasatroofia haiguste, lihaste parandamise ja tugevdamise pärast vigastust ning lihaste -rasvade metaboolsete interaktsioonide uurimiseks.

Seda kasutatakse rutiinselt Duchenne'i lihasdüstroofia hiiremudelites, lihaste regenereerimise katsetes, vanusega seotud sarkopeenia uuringutes ja prekliinilistes uuringutes, milles hinnatakse lihaste hüpertroofiat soodustavaid strateegiaid. Selle standardiseeritud rekombinantse valgu vorm pakub üliolulist ja usaldusväärset uurimisvahendit terapeutiliste hüpoteeside kinnitamiseks, mis on suunatud TGF- superperekonna signaaliülekandele lihaste ja sellega seotud metaboolsete haiguste korral rangelt kontrollitud tingimustes.

Kasutus- ja säilitusmeetodid

1. Lahustamine ja valmistamine:

Soovitatav lahusti:

Eelistatud lahusti: steriilne süstevesivõisteriilne fosfaatpuhver pH 6,0-7,4 juures. Vältige äärmuslike pH väärtustega lahustite kasutamist.

Võtmekandja: Kandjavalku tuleb lisadamanustamiskõlblikuks muutmisele ja kõikidele lahjenduslahustele .Soovitatav on steriilne PBS, mis sisaldab 0,1–1% veise seerumi albumiinipinna adsorptsiooni ja mittespetsiifilise seondumise minimeerimiseks.

Töölahuse lahjendamine: Lahjendadasteriilset PBS-i või rakukultuuri söödet, mis sisaldab sama kontsentratsiooni kandjavalku, et tagada ühtsed lahustumistingimused.

Oluline hoiatus: Ärge kasutage otse lahustamiseks puhast vett ega kandevalkudeta puhverlahust. Ärge segage, raputage tugevalt ega külmutage ega sulatage korduvalt.

Standardne ettevalmistusprotseduur:

Lahusti valmistamine:

Kasutage PBS-i (pH 7,2–7,4) või steriilset süstevett, mis on steriilselt filtreeritud läbi 0,22 μm filtermembraani.

Lisage lahustile BSA, mis ei sisalda proteaasi ega rasvhappeid, et saavutada lõppkontsentratsioon 0,1%-1%.

Lahustid on soovitatav eeljahutada-jääl või värskelt toatemperatuuril valmistada.

Rekonstitueerimisprotseduur:

Tehke protseduur puhtal pingil. Lisage 1 mg viaali 1,0 ml eeljahutatud kandjavalgu lahustit.

Laske lahustilet voolata mööda pudeli seina väga aeglaselt allakülmutatud{0}}koogi täieliku küllastumise tagamiseks javältige otsest mõju.

Asetage viaal jääle või temperatuurile 4 kraadi jalaske sellel 15-30 minutit loomulikult lahustuda. Selle aja jooksul saateväga aeglaselt ja õrnalt kallutage ja pöörakeviaalis mitu korda lahustumise hõlbustamiseks.Ärge loksutage, raputage ega tugevalt loksutage.

Lõppkontsentratsioon: 1 mg/ml põhilahus.

Doseerimine ja gradientlahjendus:

Kui see on täielikult lahustunud, jagage see kohe 5-20 μL ühekordseks kasutamiseks, kasutades jääl madala adsorptsiooniga silaniseeritud tsentrifuugi katsuteid.

Lahjendamisel kasutage PBS-i või kandevalgu sama kontsentratsiooniga söödetgradiendi lahjenduset vältida ulatuslikku-lahjendust ühes etapis.

Selge märgistus: Follistatin 344, kontsentratsioon, kandevalgu kontsentratsioon, valmistamise kuupäev, partii number.

Töökontsentratsiooni viide:

In vitro rakukatsed: Tavaliselt kasutatav kontsentratsioonivahemik on 0,1 kuni 5 ug/ml. Spetsiifiline kontsentratsioon tuleb optimeerida esialgsete katsetega, mis põhinevad rakutüübil (nagu C2C12 müoblastid) ja katse eesmärgil (proliferatsioon, diferentseerumine).

In vivo loomkatsed: Annustamine tuleb rangelt kindlaks määrata konkreetse loomamudeli kohta avaldatud kirjanduse põhjal. Levinud manustamisviisid on intraperitoneaalne, subkutaanne või intramuskulaarne süstimine, kusjuures doosid jäävad tavaliselt vahemikku ug/kg kuni mg/kg.Täpne annus tuleb määrata esialgsete katsetulemuste ja loomaeetika nõuete alusel.

Arvutamise näide: 100 ng/ml töölahuse valmistamiseks võtke 1 μL 1 mg/mL põhilahust ja lisage see 1 ml söötmele, mis sisaldab 0,1% BSA-d, et saada 1 ug/mL vahelahus. Seejärel võtke 100 μL vahelahust ja lisage see 900 μL söötmele.

Peamised punktid, mida tähele panna:

Kandjavalgud on hädavajalikud: kandjavalkudeta lahused võivad adsorptsiooni tõttu põhjustada märkimisväärset valgukadu ja põhjustada agregatsiooni.

Äärmiselt õrn: Kõik toimingud peavad vältima mullide, vahu või nihkejõudude teketvalkude konformatsiooni muutuste ja inaktiveerimise vältimiseks.

Looduslik lahustumine: Andke piisavalt aega valgu loomulikuks lahustumiseks; vajadusel võib aeglaseks lahustumiseks panna ööseks 4 kraadi juurde.

Korduvad külmutamise{0}}sulatustsüklid on rangelt keelatud: Iga viaal on pärast väljastamist ainult ühekordseks kasutamiseksja korduvad külmutamis{0}}sulatustsüklid on rangelt keelatud. Lahjendatud töölahus tuleb valmistada ja kasutada kohe.

Lahenduse olek: Pärast lahustamist peab lahus olema selge, värvitu või kahvatukollane. Flokulentse materjali olemasolu, hägusus või nähtavad osakesed näitavad, et valk võib olla agregeerunud või lagunenud ning lahus tuleb ära visata.

2. Säilitustingimused:

Lahustamata lüofiliseeritud pulber:

Pikaajaline{0}}salvestus: -80 kraadi (sügavkülm). See onainussoovitatav tingimus pikaajalise stabiilsuse säilitamiseks-.

Säilivusaeg: -80 kraadi tingimustes ning valguse ja kuivuse eest kaitstuna on säilivusaeg tavaliselt 12 kuud.

Rangelt kaitsta valguse ja niiskuse eest: Hoida originaalses heledas-alumiiniumfooliumkotis ja veenduda, et sisseehitatud-desikant on tõhus.

Valmislahus:

Jaotage kohe alikvootideks ja külmutage: Pärast sulatamist tuleks protsess läbi viia jääl ja alikvootide jagamine tuleks lõpule viia30 minuti jooksul.

Ümberpakendamine ja külmutamine: Hoida kohe -80 kraadi juurespärast ümberpakkimist. Soovitatav on kasutada ühe kuu jooksul. Säilitamine -20 kraadi juures ei ole soovitatav.

Töötav lahendus: Lahjendatud töölahusei tohi ladustada. Seda tuleks hoida jääl ja kasutada ära 4 tunni jooksul pärast valmistamist.

Transporditingimused:

tuleb transportidaallkuiv jää(-78 kraadi) tingimustes tagamaks, et see ei sulaks kogu protsessi vältel.

Transpordipakend peaks sisaldama piisavalt kuiva jääd, isoleeritud kaste ja temperatuuri jälgimise seadmeid.

3. Stabiilsus- ja töötlemisstandardid:

Füüsikalis-keemiline stabiilsus:

See on kõige stabiilsem peaaegu neutraalses pH-s (6,0–7,5) ja isotoonilises puhvris, mis sisaldab kandevalke.

See on äärmiselt tundlikmehaanilisele pingele (pööris, võnkumine, mullitamine), korduvad külmumis{0}}sulamistsüklid ja pinna adsorptsioon.

Vältida kokkupuudet tugevate hapete, tugevate leeliste, pesuainete ja oksüdeerijatega.

Bioaktiivsuse säilitamine:

põhimõtete range järgimine "kandja kaitse, õrn käsitsemine, sügav külmsäilitamine ja ühekordne{0}}kasutus" on uurimistulemuste usaldusväärsuse tagamisel ülioluline.

Vajamidagi, võtke ühendustmeie

Kuum tags: follistatiin 344 1mg/viaal inhibeerib tugevalt müostatiini, Hiina follistatiin 344 1mg/viaal inhibeerib tugevalt müostatiini tootjaid, tarnijaid, tehaseid